SOLUCIONES DE MICROSCOPIA PARA LA VIROLOGIA

Virología es un campo importante dentro de la Microbiología y está referida al estudio de los virus y enfermedades virales. El impacto de los virus en la población es enorme porque ellos causan severas enfermedades endémicas y pandémicas como la gripe española (H1N1 virus de la influenza), VIH (Virus de Inmunodeficiencia Humana), Fiebre dengue (Virus del Dengue) y más recientemente COVID-19.

El estudio de los virus, su interacción con células portadoras y la respuesta inmune al virus ayuda a desarrollar vacunas y tratamientos contra patógenos virales. Por lo tanto la Virología está fuertemente asociada a la Inmunología.

En la rutina clínica una multitud de métodos de laboratorio están disponibles para confirmar las infecciones por virus. Con el advenimiento de las técnicas moleculares y la mayor sensibilidad de las pruebas serológicas, la Virología ha cambiado rápidamente con una amplia variedad de muestras usadas para pruebas virológicas. Muchos virus pueden ser reproducidos en cultivos celulares en el laboratorio. Para hacer esto el virólogo junta muestras de virus con las células huésped adecuadas en un proceso llamado adsorción o inoculación, después de lo cual las células se infectan y producen más copias del virus. Ciertas células favorecen el crecimiento de una gran variedad de virus como las células de riñón de mono africano (células VERO), fibroblastos de pulmón humano (MRC-5) y células de carcinoma epidérmico humano (HEp-2)

Un indicador para saber que las células han reproducido exitosamente el virus es la búsqueda de cambios en su morfología o un incremento de la muerte celular (apoptosis) lo cual puede ser observado usando un microscopio invertido. Estos cambios morfológicos inducidos se denominan efecto citopático. La microscopia óptica es también una herramienta valiosa para la observación rápida y eficiente de cambios histopatológicos como la añadidura de los virus dentro de las células en los llamados cuerpos de inclusión citoplasmática. Un ejemplo destacado son los cuerpos de Negri que son inclusiones celulares patognómicas grandes que se observan típicamente con una tinción de hematoxilina y eosina (tinte HE) en diversas células nerviosas para detectar infecciones de rabia con el Lyssavirus.

El microscopio de fluorescencia es cada vez más importante en Virología. La inmunofluorescencia es un método para el diagnóstico y cuantificación certera de infecciones virales. El avance de los métodos de etiquetado por fluorescencia y de los microscopios abre muchas posibilidades para realizar estudios más refinados de las interacciones virus-huésped, la dispersión de los virus y la replicación de los mismos. El aumento de la sensibilidad, la mejor resolución y la mayor automatización de los sistemas de microscopía constituyen la base de las aplicaciones de detección que permiten a los investigadores obtener una gran cantidad de información sobre las células infectadas por virus, por ejemplo, en el tratamiento con medicamentos.

La microscopia electrónicaes usada con frecuencia para examinar la ultra estructura e identificar ciertos virus. La correlación entre la microscopia óptica y electrónica puede proporcionar conocimientos únicos de las interacciones entre virus y células huésped.

 

REQUERIMIENTOS DEL MICROSCOPIO

 

Para propósitos de observación y mantenimiento en cultivos celulares, el microscopio invertido, con opción de fluorescencia LED, buena ergonomía y alta calidad óptica para documentación digital confiable es una herramienta esencial. La inmunofluorescencia permite la rápida detección de agentes virales con pruebas de anticuerpos de fluorescencia directa (DFA) o indirecta (IFA) incluyendo los kits de prueba de anticuerpos contra el herpes simple (HSV), influenza A, otros virus respiratorios y los enterovirus.

Microscopios automatizadoscon calibración integrada, control de ambiente y opciones de fluorescencia son ideales para los laboratorios con altas exigencias de rendimiento ya que permiten la detección totalmente automatizada en 2D y 3D de cultivos celulares y tejidos. Los microscopios confocales brindan al virólogo a la opción de investigar con mucho más detalle la invasión celular y preparar la muestra respectiva para una investigación más profunda con microscopía electrónica.

Recientes desarrollos de microscopía electrónica de barrido han mostrado que pueden alcanzar la resolución y calidad de imagen requerida para el estudio de los virus. La microscopía correlativa y flujos de trabajo automatizados ahorran tiempo valiosobuscando áreas relevantes de la muestra y proporciona resultados rápidos inclusive en 3D.

 


APLICACIONES


Distribucion intracelular y unida a la membrana de citomegalovirus marcados con GFP

La forma característica de las células las identifica como células de rotavirus 

Interacciones de virus con bacterias como ocurre en la placa bacteriana

Cultuvos neuronales primarios teñidos para antígenos de bornavirus y toxina tetánica

Hela Cells – Imagen con ZEISS Primovert

 

 

 

Sistemas de microscopio recomendados para virología:


 

  
ZEISS Primovert - Enfoque en la Bioseguridad
 
Coloque el microscopio ZEISS Primovert dentro de su cabina de flujo laminar. Examine rápida y eficientemente células sin teñir con contraste de fases y células marcadas con GFP con fluorescencia. El microscopio invertido es perfecto para tareas de rutina clínica como la observación de cultivos celulares. Con la cámara integrada del Primovert HDcam puede usar su iPad y la aplicación gratuita Labscope para observar y discutir las imágenes con su equipo de trabajo. De esta manera, la bioseguridad es mejorada pues imágenes se obtienen a distancia y de forma inalámbrica. El software Labscope permite tomar fotos, hacer anotaciones, mediciones, crear reportes, y compartirlos fácilmente.
 

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ZEISS axiovert.a1
ZEISS Axio Vert.A1 - Fluorescencia Multicanal
 
Escoja entre todas las técnicas estándar de contraste incluyendo Contraste Diferencial de Interferencia (DIC), para investigar sus cultivos celulares. Axio Vert.A1 es la herramienta ideal para tareas básicas y avanzadas de cultivo celular usadas en Virología e Inmunología. Es robusto, fácil de usar, ergonómico y puede operar con fluorescencia. Observaciones de inmunofluorescencia para detectar virus, estudios CRE y otros son fácilmente realizables. Con las cámaras Axiocam202 (monocromática) o 208 (color) puede documentar su trabajo con solo presionar un botón. Labscope es la aplicación de imagen que le permite adquirir imágenes de fluorescencia multicanal fácilmente sea con un iPad o una computadora con sistema operativo Windows.
 

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ZEISS LSM 900

  
ZISS LSM 900 - Microscopia Confocal 
 
El microscopio confocal LSM 900 proporciona la mejor calidad posible de imagen, eso significa un contraste nítido, alta resolución, así como la mayor sensibilidad en la observación de sus muestras fijas o vivas sin blanqueamiento. El microscopio confocal LSM 900 con Airyscan 2 tiene todo esto y más. Puede obtener imágenes con una excelente relación señal-ruido. También puede conseguir las más altas velocidades de adquisición con el nuevo modo Multiplex para Airyscan 2,cuyo sistema de detección inteligente permite adquisiciones en paralelo. Usted puede observar ahora procesos dinámicos como interacciones virus- huésped y muestras vivas sin sacrificar la calidad de la imagen.
 

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ZEISS celldiscoverer 7 
Celldiscoverer 7 de ZEISS - Microscopia Automatizada

Celldiscoverer 7 combina la facilidad de uso de un microscopio automático con la calidad de imagen y flexibilidad del clásico microscopio invertido de investigación. Celldiscoverer 7 se calibra a sí mismo, detecta y enfoca sus muestras mientras que la óptica se ajusta a sí misma. Ya sea trabajando en cultivos celulares o secciones de tejido 2D o 3D usted puede adquirir imágenes en menor tiempo con su plataforma automática y confiable. Alto rendimiento y alta resolución son claves en la investigación de virus y la respuesta de éstos a ciertos medicamentos. Junto con el nuevo LSM 900 con Airyscan 2 puede capturar procesos dinámicos en sus muestras vivas con las velocidades de captura más altas en súper resolución.
 

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ZEISS GeminiSEM 

ZEISS GeminiSEM - Microscopia de Resolucion Sub Nanometrica

Detecte y caracterice los patógenos virales con alta resolución y un gran campo de visión con la tecnología Gemini. La óptica Gemini es el resultado de más de 20 años de experiencia en microscopia electrónica de emisión de campo (FESEM). Puede generar imágenes de alta resolución de virus en el modo transmisión con el detector aSTEM que son comparables a imágenes de TEM. Con la microscopía correlativa entre microscopios óptico y electrónico obtenga información funcional y estructural única en sus estudios de interacción virus-huésped.

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